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标题:羊胚胎移植
发布时间:2013-3-23 22:45:54  
 

羊胚胎移植

1、胚胎移植就是把一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫内冲洗出来,移植到另一头雌性动物的输卵管或子宫内使其继续发育为胎儿,其目的是使生产性能差的雌性动物能生产出良种后代,迅速增加良种数量,大大提高繁殖效率和经济效益。
    供体羊的选择,超排处理与配种回收
    选取8002D号供体羊,进行超排处理,肌肉注射LH200U(促黄体素,由中国科学院动物研究所提供)。每天肌注2次连续注射4d,前2d每次肌注10U,以后逐日递减。总量为50-60U。第3天和第4天同时各注1次氯前列稀醇0.1mg,自注射后38-48h观察发情。第1次授精应在发情后8h进行,随后应每隔8-10h授精1次,一般需授精3-4次,效果较好。回收胚胎要根据胚胎发育阶段时间来确定,一般在超排处理授精后5-6d回收(子宫角手术法),回收术前1d饥饿24h,确定部位,剪手、消毒、局部麻醉,羊采取前低后高半仰姿势(前半身侧卧,后半身仰卧式)保定在手术台上,在腹下肌内侧乳房边缘做4-5cm切口,逐层切开,切开腹膜后,将中指和食指伸入腹腔在骨盆腔前沿膀胱之下角摸子宫角,把子宫角牵引到切口之外,再小心把卵巢引出来,检查卵巢发育情况,回收时用套有乳胶管的肠钳夹住子宫角后1/3处,再用血管夹夹化住宫管接合部之前的输卵管,以防冲洗液流入输卵管,然后在宫管接合部后约3cm处向宫管接合部方向插入进液针头,向子宫内注入冲洗液,在子宫角夹住前端插入一个回收圆针,后端带有胶管收集冲出液,回收液用量一般为30-50ml,一侧冲洗结束时,除去器械检查针孔,确认无出血现象,涂上1ml甘油,安全送于腹腔内,然后按上述同一操作办法进行另一侧冲洗,两侧冲洗守毕后,将子宫送回腹腔并注入腹腔内抗生素,以防粘连,逐层进行缝合。从子宫回收的冲卵液检出胚胎,鉴定胚胎发育状况,把发育成熟的胚胎,用吸卵管吸取转移胚胎,放入存有PBSS中保存准备移植,在24-26℃的条件下,可保存4-5h移植没有明显影响,要想保存更长时间,就要对胚胎进行降温处理。 
   2、 受体羊的选择和同期发情处理及移植手术
    选9039号羊为受体羊,称植胚胎时受体羊必须和供体羊处于相同的发情阶段,才能获得较高的成功率,在供体羊超排处理全部过程的同时给受体羊采用2次注射法每日1次,首次注射氯前稀醇0.1mg,第2次注射0.05mg,注射后40-48h观察发情。供体与受体羊的发情同步差只允许在20-24h内进行移植,否则影响妊娠率。
    手术移植基本过程与手术回由相同,切开腹膜之后,以中指伸入腹腔把子宫角勾在中指内侧,拇指在腹腔外旋压,中指紧切腹壁内侧向切口方向移动,就可以把子宫角拉出,引出卵巢检查黄体,无黄体或黄体过小的受体不能做移植,子宫内移植时,应在黄体侧子宫角前1/3处避开血管把移植针插入,摆动针头确定针头在子宫腔内注入胚胎,移植结束后,把子宫角送入腹腔,按手术要求缝合腹壁创口。
   3 影响胚胎移植的因素 
    供体羊取决于成年母羊体内环境与外界多种措施及胚胎质量如何。受体羊主要是与供体羊发情同步化程度,受体羊的黄体功能、品种、年龄、手术损伤及外界多方面因素,都影响成功率。胚胎质量和发育期对移植成功率也有直接关系,发育延迟和变性胚胎移植成功率很低,胚胎移植在普通温度下进行成功率高,在高温情况下移植成功率低,所以胚胎回收后,应尽快移植,鲜胚一般在体外保存不得超过4~8h,才能获得较高的胚胎发育率。

 
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